Kwalitatieve analyse voor hepatitis C

Laat een reactie achter 9.080

Een kwalitatieve analyse van de polymerasekettingreactie - PCR voor hepatitis C bepaalt de aanwezigheid of afwezigheid van HCV in het lichaam. Onder laboratoriumomstandigheden wordt de structuur van RNA bestudeerd, waaronder het virus. In het geval van detectie van het virus C, is het noodzakelijk om een ​​behandeling te ondergaan, omdat de verwaarloosde toestand van de lever ernstige gevolgen zal hebben. Hoogwaardige PCR wordt ook uitgevoerd na herstel om de afwezigheid van antilichamen te bevestigen. Toegekend voor routine-inspectie. Bij een lage concentratie van het veroorzakende agens in het bloed kan PCR (kwalitatief) niets detecteren, omdat het diagnostische systeem zijn eigen gevoeligheidsdrempels heeft. In het geval van de eerste fase van de ziekte of de milde vorm, worden PCR-ultradiagnostiek uitgevoerd op ultragevoelige apparatuur.

Wat is RNA-virus?

De term RNA van het hepatitis C-virus (of hepatitis C-virus-RNA) is de leverziekte zelf. Virus C bindt zich aan de gezonde cel van het lichaam door erin te penetreren. Na verloop van tijd, verspreid door het lichaam, is het alleen nodig om in het bloed te komen. Het gevolg is dat de ziekteverwekker de lever binnendringt, zich vermengt met zijn cellen en hard werkt. Levercellen (hepatocyten) werken onder zijn invloed, ondergaan veranderingen en van daaruit sterven ze. Hoe langer het virus C in de lever zit, hoe groter het aantal cellen dat sterft. Ontwikkel in de loop van de tijd gevaarlijke ziektes die tot kwaadaardige degeneratie en de dood leiden.

Infectie van de lever met dit type virus manifesteert zich mogelijk niet extern. Gedurende vele jaren of decennia voelt een geïnfecteerde persoon zich volledig gezond en alleen een willekeurig onderzoek onthult meestal pathologie. Bij het doneren van bloed voor hepatitis wordt een deel van de RNA (ribonucleïnezuur) keten, dat deel uitmaakt van het menselijke gen (DNA), onderzocht. De resultaten van laboratoriumtests mogen niet worden gebruikt voor zelfbehandeling, omdat dit slechts een indicator is. Het exacte beeld en de verdere diagnose wordt beter bepaald door de arts.

Wanneer gedaan: indicaties voor onderzoek

Bij bevestiging van HCV wordt PCR-analyse uitgevoerd (polymerasekettingreactie). PCR-onderzoeken helpen om het pathogeenmateriaal in de structuur van RNA te vinden en een effectieve therapie voor te schrijven. Benoemd in de volgende gevallen:

  • detectie van tekenen van ontsteking van de lever;
  • screeningstudies voor preventie;
  • onderzoek van contactpersonen;
  • diagnose van hepatitis van gemengde oorsprong (bepaling van de belangrijkste ziekteverwekker);
  • het bepalen van het niveau van reproductie-activiteit van het virus in de chronische vorm;
  • cirrose van de lever;
  • om de effectiviteit van de voorgeschreven behandeling te bepalen.
PCR-onderzoeken worden door een arts voorgeschreven om de effectiviteit van een behandeling voor hepatitis te bepalen.

Er is zowel een kwalitatieve als een kwantitatieve analyse van PCR. Kwantitatieve PCR toont de procentuele verhouding van RNA tot virusdragers in het bloed en kwalitatief betekent virale aanwezigheid of afwezigheid. Een positieve indicator van kwaliteit (aanwezigheid van Hepatitis C RNA) heeft ook kwantitatief onderzoek nodig. Een hoog concentratieniveau van de veroorzaker van hepatitis C is geassocieerd met het risico van overdracht, dat wil zeggen infectie van anderen. Lage tellingen zijn beter te behandelen. De hoeveelheid RNA-virussen in het bloed is niet gerelateerd aan de intensiteit van de ziekte. PCR-analyse wordt ook gedaan in het geval van interferontherapie om de duur en de complexiteit van de behandelingskuur voor te schrijven.

Kenmerken van hoogwaardige PCR-analyse voor hepatitis C

Een kwalitatieve analyse met de polymerasekettingreactie-index wordt toegekend aan alle patiënten die antilichamen tegen hepatitis C in hun bloed hebben.Degenen die ziek en hersteld zijn, moeten de test opnieuw nemen. Het wordt aanbevolen om de test voor hepatitis B te doorstaan, vervolgens, in het geval van een positieve conclusie, en voor hepatitis D. Ook moet een kwalitatief geanaly- seerde reactie worden uitgevoerd in combinatie met andere bloedonderzoeken. Analyses laten een compleet beeld zien van de virale verspreiding.

Uit de testresultaten zal alleen een positieve test voor hepatitis C zichtbaar of negatief zijn, dat wil zeggen de aanwezigheid of afwezigheid van een virus. Als de uitvoer wordt "gedetecteerd", is en blijft het virus actief. De aanduiding "niet gedetecteerd" geeft de afwezigheid van een virus of de kleine hoeveelheid aan. Met deze indicator moet in gedachten worden gehouden dat de analytische gevoeligheid van diagnostische systemen verschillend is en dat RNA-hepatitis C mogelijk nog steeds in het bloed zit, maar niet tot uiting komt in de analyse.

Bijzonder gevoelige PCR-methode ultra-hepatitis C onthult zelfs in kleine hoeveelheden. Er werd een onderzoek naar fluorescente hybridisatie gebruikt, dat vele malen hoger is dan bij standaard PCR-systemen. De methode wordt in verschillende gevallen gebruikt:

  • verdachte verborgen vormen van hepatitis C;
  • PCR-diagnostiek bevestigde de pathogeen niet, maar er zijn antilichamen;
  • in geval van herstel;
  • om vroege infectie te detecteren.
Terug naar de inhoudsopgave

Decoderingsanalyse

Het PCR-decoderen van HCV beïnvloedt de uiteindelijke beslissing bij het stellen van een diagnose, in het bijzonder met de ultrametod-methode. Het grootste nadeel van deze studie is de strikte naleving van steriele omstandigheden voor het monster en de materialen. Een kleine afwijking vertoont soms onnauwkeurige analytische conclusies, bemoeilijkt de diagnose en de daaropvolgende behandeling. Analyse van PCR voor de bepaling van hepatitis-RNA geeft niet altijd een zelfverzekerd beeld van de ziekte, soms zijn onnauwkeurigheden toegestaan ​​en in beide richtingen.

Het diagnosticeren van het hepatitis-virus, is het raadzaam om een ​​uitgebreid onderzoek te gebruiken.

Norm van indicatoren

De afwezigheid van JgM-antilichamen tegen virale hepatitis C in de resultaten van het onderzoek wordt beschouwd als de norm bij de analyse van de polymerasekettingreactie. Tegelijkertijd wijzen de bevindingen van de serologische analyse op de aanwezigheid van antilichamen tegen het C-virus en dit valt ook binnen het normale bereik. Een kwalitatieve definitie toont niet de intensiteit van de ziekte, het onthult alleen de veroorzaker van hepatitis C in RNA. Deze analyse wordt na de behandeling herhaald om het daadwerkelijke herstel te bevestigen.

afwijkingen

Als JgM-antilichamen tegen HCV-RNA aanwezig zijn, duidt dit op een zich ontwikkelende infectie. De ziekte treedt tegelijkertijd acuut of chronisch op, wat zich in verschillende stadia manifesteert. Als een afname van het aantal antilichamen wordt geregistreerd, geeft de analyse aan dat de resultaten van de behandeling tijdens herstel zijn bereikt. Alleen extreem zeldzame gevallen van valse positieven worden gevonden in de diagnose. Ze zijn te vinden bij vrouwen tijdens de zwangerschap en bij mensen met andere besmettelijke ziekten.

De kosten van bloedtesten en PCR voor hepatitis C

Hepatitis C is een inflammatoire pathologie waarbij de levercellen worden aangetast. De ziekte ontwikkelt zich als gevolg van de penetratie van het hepatitis C-virus (HVC) in het menselijk lichaam.

De vorm van de ziekte kan acuut of chronisch zijn.

Meestal zijn de symptomen van de acute vorm van pathologie bij de meeste patiënten afwezig, soms gaat de ziekte gepaard met pijnlijke gevoelens in de buik, verminderde prestaties, verhoogde vermoeidheid, verlies van eetlust, een donkere tint van urine, verkleuring van ontlasting, geelheid van de huid en slijmvliezen, gewrichtspijn. Dergelijke symptomen komen meestal 6-8 weken na infectie voor, maar kunnen na zes maanden optreden.

Met de ontwikkeling van dergelijke verschijnselen, is het noodzakelijk om contact op te nemen met een medische instelling en een uitgebreid onderzoek van het hele organisme te ondergaan. Als onderdeel van een medisch onderzoek wordt een bloedtest voor hepatitis C uitgevoerd.

Tegenwoordig kan deze pathologie, met behulp van moderne diagnostische technieken, in het beginstadium van ontwikkeling worden geïdentificeerd, wat de kansen op een volledige genezing van de ziekte aanzienlijk vergroot.

De volgende groepen mensen moeten testen op hepatitis C:

  • vrouwen in de periode van het dragen van een kind;
  • personen met tekenen van hepatitis;
  • medisch personeel;
  • mogelijke orgaan- en bloeddonoren;
  • drugsverslaafden, HIV-geïnfecteerden, promiscuous intieme leven.

Lijst met vereiste onderzoeken

Welke tests moet ik nemen voor hepatitis C? Om de ziekte nauwkeurig te diagnosticeren, de oorzaken ervan te bepalen en de toestand van het leverparenchym te bepalen, zijn de volgende studies vereist:

  • algemene urine- en bloedtesten;
  • biochemische analyse van bloed;
  • PCR-analyse;
  • bloedtest voor detectie van antilichamen tegen HVC;
  • een bloedtest voor bestaande antilichamen tegen zijn eigen levercellen;
  • leverbiopsie.

Het decoderen van bloedtesten voor hepatitis C wordt uitgevoerd door een specialist. Overweeg elke methode van onderzoek in meer detail, evenals we zullen begrijpen welke analyse van hepatitis C de meest accurate is.

Algemene analyse

Bij het uitvoeren van een algemene bloedtest op hepatitis C, kunt u de toestand van de patiënt evalueren. Veranderingen in bloedparameters worden niet gezien als specifieke symptomen van hepatitis, maar bij deze ziekte zijn er aandoeningen zoals:

  • verminderde concentratie van hemoglobine, bloedplaatjes en leukocyten;
  • verhoogt het gehalte aan lymfocyten;
  • bloedstolling wordt geschonden;
  • erythrocyte bezinkingssnelheid (ESR) neemt toe.

Algemene analyse van urine maakt het mogelijk om in zijn samenstelling urobeline te detecteren - een galpigment dat in de urine voorkomt als gevolg van een verstoord functioneren van de lever.

Biochemische analyse

Biochemische analyse van bloed bij hepatitis C maakt het mogelijk om stoornissen te identificeren zoals:

  • verhoogde niveaus van leverenzymen (alanine transaminase - ALT en aspartaat aminotransferase - AST), die het bloed binnenkomen wanneer hepatocyten zijn beschadigd. In een normale toestand mogen deze indicatoren voor mannen niet meer zijn dan 37 IE / l, voor vrouwen - niet hoger dan 31 IE / l. Een verhoogde concentratie van ALT en AST bij asymptomatische hepatitis C is vaak het enige symptoom van deze ziekte. Bovendien neemt het alkalische fosfatase van bloedglutamyltranspeptidase toe in bloed (normaal niet hoger dan 150 IE / l).
  • het bilirubine-gehalte (zowel algemeen als direct) in het bloed wordt overschreden. Als het niveau van geel pigment in het serum hoger is dan 27-34 μmol / l, treedt geelzucht op (tot 80 μmol / l in milde vorm, 86-169 μmol / l - in matige, boven 170 μmol / l - in ernstige vorm).
  • Het niveau van albumine wordt verlaagd, de concentratie van gamma-globulinen neemt daarentegen toe. Gamma-globulines bestaan ​​uit immunoglobulines - antilichamen die het lichaam beschermen tegen ziekteverwekkende stoffen.
  • verhoogde concentratie van triglyceriden in het bloed.

PCR-test

Met behulp van de PCR-techniek is het mogelijk om de veroorzaker van de ziekte te diagnosticeren. Het uitvoeren van deze analyse maakt het mogelijk om een ​​virus in het bloed te detecteren, zelfs als de hoeveelheid ervan minimaal is. De PCR-analyse voor hepatitis C maakt het mogelijk om de bestaande infectie in het bloed al na 5 dagen vanaf het moment van infectie te bepalen, dat wil zeggen lang voordat antilichamen verschijnen.

Als het resultaat van een bloedtest op hepatitis C via PCR positief is, duidt dit op de aanwezigheid van een actieve infectie in het lichaam. Met behulp van deze methode kunt u een kwalitatieve en kwantitatieve studie van HVC RNA uitvoeren.

In de loop van de kwalitatieve analyse van PCR voor hepatitis C is het mogelijk om een ​​bestaand virus in het menselijk lichaam te detecteren.

Deze diagnostische procedure wordt uitgevoerd als anti-HVC in het bloed wordt gedetecteerd.

Het ontcijferen van de analyse voor hepatitis C bevat informatie dat een infectie al dan niet is gedetecteerd in het lichaam. Normaal gesproken worden er geen pathologische stoffen in het bloed gevonden.

Als de hepatitis C-test positief is, betekent dit dat de ziekteverwekker zich continu verdeelt en de levercellen infecteert.

De resultaten van deze analyse kunnen onbetrouwbaar zijn, het is mogelijk in de volgende gevallen:

  • vervuild gebruikt biomateriaal;
  • in aanwezigheid van heparine in het bloed;
  • in de aanwezigheid van chemische of proteïnestoffen (remmers) in het bestudeerde biomateriaal, die de elementen van PCR beïnvloeden.

Kwantitatieve analyse van hepatitis C geeft informatie over de hoeveelheid virus in het bloed, dat wil zeggen, bepaalt de virale last. Met dit concept wordt bedoeld het volume HVC-RNA dat in het bloed aanwezig is (bijvoorbeeld in 1 ml). In de interpretatie van de kwantitatieve analyse voor hepatitis C wordt deze waarde uitgedrukt in digitaal equivalent, gemeten in IE / ml.

Bloed voor PCR voor hepatitis C wordt vóór therapeutische maatregelen genomen. Nadat de analyse is uitgevoerd na 1, 4, 12 en 24 weken. Het onderzoek in week 12 is indicatief en wordt uitgevoerd om de effectiviteit van de medische procedures te beoordelen.

Als de test voor hepatitis C tijdens de zwangerschap positief is en de virale belastingswaarden worden overschreden, neemt het risico van overdracht van ziekteverwekkers van de zieke moeder op het kind meerdere keren toe. Ook, met verhoogde waarden van virale lading, is de implementatie van therapeutische maatregelen moeilijk.

Volgens het transcript van tests voor hepatitis C, als de virale belastingswaarden 800.000 IU / ml overschrijden, dan is het hoog. Als de cijfers lager zijn dan 400.000 IE / ml, wordt het niveau van de virale lading als laag beschouwd.

Analyse van hepatitis C met PCR wordt als de meest accurate beschouwd en heeft verschillende voordelen ten opzichte van andere onderzoeksopties, namelijk:

  • directe diagnose van de veroorzaker van de ziekte. Bij het uitvoeren van traditionele studies wordt bepaald door de aanwezigheid van eiwitmarkers die afvalproducten zijn van pathogenen. Dit geeft alleen aan dat de infectie in het bloed aanwezig is. Bij het testen op hepatitis C met PCR is het mogelijk om het type pathogeen van gevaarlijke pathologie te bepalen.
  • specificiteit van de techniek. Tijdens deze procedure wordt een uniek DNA-gebied bepaald in het biomateriaal dat overeenkomt met slechts één type pathogeen. Dit minimaliseert de kans op foutieve resultaten.
  • hoge gevoeligheid. Wanneer u PCR-analyse uitvoert, kunt u de minimale hoeveelheid virus detecteren. Dit is belangrijk als conditioneel pathogene stoffen worden geïdentificeerd die alleen een bedreiging vormen als hun niveau stijgt.
  • Wanneer deze techniek in één monster van het biomateriaal wordt gebruikt, kunnen verschillende pathogenen tegelijkertijd worden gedetecteerd.
  • kan verborgen infecties detecteren. Bovendien kunt u met de analyse pathogene micro-organismen diagnosticeren die in cellen leven en een hoge antigene variabiliteit hebben.

Als de testresultaten positief zijn, worden sporen van het virus gevonden in het biomateriaal, waarna het netwerk een infectie in het lichaam heeft.

Een negatieve PCR-analyse voor hepatitis C betekent dat er geen sporen van infectie in het biomateriaal zijn.

Immunologisch onderzoek

Met deze methode kunt u antilichamen tegen alle typen hepatitisvirus identificeren, evenals antilichamen tegen de levercellen van uw eigen lichaam, waarvan het uiterlijk bijdraagt ​​aan de ontwikkeling van auto-immune hepatitis.

De resultaten die tijdens het onderzoek zijn verkregen, zijn 3 maanden relevant, daarna moet u opnieuw bloed doneren voor hepatitis C.

Het is ook mogelijk om een ​​uitdrukkelijke studie uit te voeren met behulp van speciale teststrips. Deze analyse maakt het mogelijk om antilichamen tegen virus C te bepalen in de samenstelling van bloed en speeksel. Deze procedure kan onafhankelijk thuis worden uitgevoerd.

Lever biopsie

Om een ​​dergelijke analyse uit te voeren, wordt een element van het leverparenchym genomen en wordt een histologisch onderzoek van het verkregen biomateriaal uitgevoerd. Hiermee kunt u de toestand van het lichaam beoordelen: om inflammatoire, necrotische foci, stadium van fibrose en dergelijke te identificeren.

Tegenwoordig worden er tests gebruikt die de histologische analyse van het leverparenchym vervangen.

Om het stadium van leverschade en de intensiteit van het ontstekingsproces te beoordelen, worden specifieke veneuze bloed biomarkers gebruikt. Met behulp van FibroTest kunt u de mate van groei van fibreus weefsel beoordelen.

Bij het uitvoeren van Actitest kunt u informatie krijgen over de intensiteit van pathologische processen in het leverparenchym. Gebruik van Steatototesta kan vetweefsel van de lever diagnosticeren en de omvang van dit proces beoordelen. Fibromax bestaat uit alle bovenstaande tests en kan enkele andere onderzoeken omvatten.

Voorbereiding op de studie

Welke tests worden er genomen voor hepatitis C en hoe we dit of dat type onderzoek hebben ontdekt. Het is even belangrijk om te weten hoe je je moet voorbereiden op de analyse.

Voor het verkrijgen van betrouwbare resultaten wordt aanbevolen om te voldoen aan de volgende vereisten:

  • Hepatitis C-tests moeten 's morgens op een lege maag worden uitgevoerd. De laatste keer dat voedsel wordt geconsumeerd, moet minstens 8 uur vóór het onderzoek worden ingenomen.
  • Het biomateriaal kan overdag of 's avonds worden verzameld. In dit geval is het belangrijk dat er tussen de laatste maaltijd en de analyse minstens 5-6 uur verstrijken.
  • voordat bloed wordt gedoneerd voor hepatitis C, moeten thee, koffie, sap of andere dranken worden weggegooid, alleen water is toegestaan.
  • 48 uur voorafgaand aan de studie, is het noodzakelijk om het gebruik van vet, gefrituurd voedsel en alcoholhoudende dranken uit te sluiten.
  • voor minstens een uur vóór de analyse, moet u zich onthouden van roken.
  • analyse mag niet onmiddellijk worden uitgevoerd na een echografie, instrumenteel onderzoek, röntgenonderzoek, massage of fysiotherapie.
  • één dag voorafgaand aan de uitvoering van het onderzoek, is het noodzakelijk om het gebruik van medicatie en intensieve lichaamsbeweging uit te sluiten. Emotionele stress is ook gecontra-indiceerd.
  • Het wordt aanbevolen om 15 minuten door te brengen voordat u het onderzoek in een rustige staat uitvoert.

De bloedinzamelingsprocedure uitvoeren

Waar moet je worden getest op hepatitis C? De bemonstering van biomateriaal voor verder onderzoek wordt uitgevoerd in het laboratorium van een medische instelling of bij de patiënt thuis.

Bloed uit een ader wordt als volgt genomen:

  • met behulp van een speciale tourniquet gewikkeld rond de onderarm van de patiënt, wordt de veneuze bloedstroom gestopt. Dankzij dergelijke manipulaties worden de aderen gevuld met bloed en zullen ze beter zichtbaar zijn, wat het inbrengen van de naald aanzienlijk zal vergemakkelijken.
  • het gebied van de huid waar de naald wordt ingebracht, wordt zorgvuldig behandeld met alcohol of alcoholhoudende vloeistof.
  • Een naald wordt voorzichtig in een ader ingebracht, waarna er een reageerbuis aan wordt bevestigd, speciaal ontworpen voor het verzamelen van bloed.
  • Onmiddellijk nadat de naald in de ader is ingebracht, wordt het uitknijpharnas van de arm van de patiënt verwijderd.
  • nadat het bloedvolume dat nodig is voor de analyse is verzameld, wordt de naald voorzichtig uit de ader verwijderd.
  • Op de injectieplaats moet een steriel wattenstaafje of gaasje worden aangebracht dat is bevochtigd met alcohol.
  • om het optreden van een hematoom te voorkomen, moet de tampon met enige moeite tegen het naaldinbrenggebied worden gedrukt, de arm bij het ellebooggewricht buigen en deze gedurende enkele minuten in deze positie houden. Dergelijke acties zullen ook helpen om het bloed sneller te stoppen.

Op voorwaarde dat de techniek van interne administratie goed is, is deze procedure absoluut veilig en veroorzaakt het geen pijnlijke gevoelens.

In zeldzame gevallen, na bloedafname, kunnen aderen zwellen. Dit fenomeen wordt "flebitis" genoemd. Een kompres (niet heet) zal het probleem helpen oplossen, het moet meerdere keren per dag op opgezwollen delen van de huid worden toegepast.

Bepaalde problemen kunnen ook optreden als er een bloedingsaandoening is. Het gebruik van aspirine, warfarine en andere bloedverdunners kan bloedingen veroorzaken. Daarom is het voor het uitvoeren van de analyse verplicht om medicatie te weigeren. Als de behandeling niet kan worden geannuleerd, moet u de specialist hierover informeren.

Data en prijzen

Hoeveel wordt er getest op hepatitis C? De resultaten van een bloedtest op hepatitis kunnen binnen een paar uur klaar zijn en binnen een paar dagen (in de regel niet langer dan 8 dagen). De duur van de voorbereiding van de resultaten hangt af van het type virus en de gekozen analysemethode. Sneller is de studie uitgevoerd met de PCR-methode. De resultaten in dit geval zijn binnen enkele uren gereed.

Hoeveel kost een hepatitis C-test? Afhankelijk van de kliniek en de complexiteit van de studie, kan de prijs van de procedure variëren van 400 tot 11.000 roebel.

U moet zich ervan bewust zijn dat het enkele weken kan duren om voldoende antilichamen tegen HVC te vormen. Daarom kan in een vroeg stadium van de ontwikkeling van de pathologie het resultaat van een onderzoek vals-negatief zijn.

Bovendien is het verkrijgen van onbetrouwbare gegevens mogelijk met een slechte analyse van de kwaliteit en overtreding van de transportvoorwaarden van het verkregen biomateriaal (monsters moeten maximaal 2 uur na bloedafname in het laboratorium worden afgeleverd).

Als het resultaat van het onderzoek positief is, moet u onmiddellijk contact opnemen met een arts voor infectieziekten. De specialist voert een aanvullend onderzoek uit en schrijft de juiste behandeling voor.

Een PCR-analyse uitvoeren voor hepatitis C en de resultaten decoderen

Hepatitis C PCR-analyse is een onderzoek waarvan het hoofddoel is het genetische materiaal van het veroorzakende agens te identificeren. De analyse onthult de veroorzaker van de ziekte door de polymerasekettingreactie te gebruiken. Deze diagnose heeft een hoge mate van nauwkeurigheid, specificiteit om de afwezigheid of aanwezigheid van een virale infectie te detecteren.

De essentie van de diagnose

Voor het uitvoeren van een PCR-analyse voor de bepaling van het hepatitis C-virus van een patiënt wordt veneus bloed afgenomen, dat mogelijk het RNA (ribonucleïnezuur) HCV van het gewenste virus bevat.

De PCR-test voor hepatitis C impliceert de procedure wanneer het volgende aan de bloeddeeltjes van de patiënt wordt toegevoegd:

  • primers (korte kunstmatig gesynthetiseerde regio's van het noodzakelijke gen);
  • speciaal enzym (RNA-polymerase).

Nadat de verzameling biologisch materiaal is verzonden voor onderzoek in het laboratorium. Eén deel van het bloed is nodig voor directe PCR-analyse, de tweede wordt door de ELISA-methode naar de studie gestuurd. Het enzym kan in een korte tijd het aantal genetisch materiaal van het virus van het pathogeen vergroten. In een speciaal apparaat worden verschillende cycli van warmte- en koelprocessen uitgevoerd. In het laatste stadium wordt het verkregen materiaal vergeleken met de genen van het virus en wordt een conclusie getrokken over de aan- of afwezigheid van pathologie in het lichaam van de patiënt.

De essentie en het gedrag van PCR-analyse in het laboratorium. Gefilmd door SiberianMedicalLaboratory.

Soorten onderzoek

Er zijn 3 soorten diagnoses die het mogelijk maken om de aanwezigheid van het hepatitis C-virus in het menselijk lichaam te bepalen:

  • genotypering;
  • kwaliteit;
  • kwantitatief.

Kwalitatieve methode

Diagnose van hepatitis C met een kwalitatieve methode is van toepassing op patiënten bij wie antilichamen tegen het virus worden gedetecteerd in de bloedtest. In het geval van de aanwezigheid van de acute fase van HCV-RNA, maken dergelijke diagnostische maatregelen het mogelijk de aanwezigheid van de ziekte binnen 1-2 weken na infectie te bepalen. Gedurende deze periode zijn mogelijk nog geen antilichamen tegen hepatitis C ontwikkeld.

Kwantitatieve methode

Een kwantitatieve diagnostische methode wordt gebruikt om de concentratie van het virus in bloedmonsters te bepalen. Een dergelijke test voor viremie (mate van concentratie) maakt het mogelijk om nauwkeurig het aantal eenheden van viraal RNA te bepalen. Het eindresultaat wordt uitgedrukt in het overeenkomstige volume. Als we het hebben over kwantitatieve analyse, worden de indicatoren gemeten in 1 ml (1 cub Cm).

De parameter voor virale belasting betekent het besmettingsniveau van de ziekte, dat wil zeggen dat het de graad van "infectiviteit" van de patiënt weergeeft. In de praktijk betekent dit dat hoe hoger de concentratie van het virus in het bloed, hoe groter de kans dat de patiënt anderen met hepatitis C infecteert. Een kwantitatieve onderzoeksmethode maakt het ook mogelijk de kwaliteit en effectiviteit van de uitgevoerde behandeling vast te stellen.

genotypering

Genotypering onthult mutaties van de veroorzaker van de ziekte. Alvorens een behandelingsplan voor te schrijven, wordt het genotype van het virus bepaald: de kwaliteit en de duur van de behandeling hangen ervan af. Bijvoorbeeld, in de behandeling van I-type ziekte, is de efficiëntie 60%, in het geval van II, III-type - ongeveer 80%.

Voordelen van PCR-analyse voor hepatitis

Een van de belangrijkste voordelen van de procedure zijn:

  1. De mogelijkheid van een vroege diagnose. PCR-analyse kan de aanwezigheid van een virus detecteren in de vroege stadia van infectie.
  2. Lage foutresultaten. Met de bestudeerde biologische hulpbron kunt u een gedeelte van het genetisch materiaal diagnosticeren dat kenmerkend is voor slechts één type virale infectie. Deze omstandigheid maakt het mogelijk valse diagnostische resultaten te voorkomen.
  3. Hoge mate van gevoeligheid. PCR-analyse is in staat RNA-virussen in kleine hoeveelheden te detecteren, wat het ook mogelijk maakt om latente infecties op tijd te volgen.

Indicaties voor

Testen op PCR voor hepatitis C is noodzakelijk, indien beschikbaar:

  • contact hebben met zieke mensen, wat kan leiden tot infectie;
  • symptomen van levercirrose (vergroting van de milt, onkarakteristieke veranderingen in de grootte van de lever, detectie van een veneuze plexus op de buik onder de huid);
  • positieve resultaten van ELISA;
  • verhoogde activiteit van AST en ALT (gemanifesteerd in de biochemische analyse van bloed);
  • de noodzaak om het gedrag van antivirale therapie te beheersen;
  • de eerste fase van de behandeling voor de noodzaak om een ​​virale lading tot stand te brengen;
  • het uitvoeren van de laatste fase van de therapie om mogelijke recidieven te elimineren;
  • de aanwezigheid van hepatitis B bij de patiënt om de ontwikkeling van een gemengde leverschade uit te sluiten.

Hoe zich voor te bereiden op bloeddonatie voor PCR-onderzoeken

Voorbereiding voor PCR-analyse omvat de volgende aanbevelingen:

  • bloed wordt 's morgens genomen;
  • analyse wordt uitgevoerd op een lege maag, dus het is raadzaam om een ​​pauze te nemen tussen de laatste maaltijd van 8-10 uur;
  • een paar dagen voor de diagnose moet vet, pittig en gefrituurd voedsel, alcoholische dranken en roken worden uitgesloten;
  • een dag voor de analyse moet men zich onthouden van zware lichamelijke inspanning, klassen uitsluiten in de sportschool of het zwembad.

Analyseresultaten: normen en afwijkingen

De analyse zelf is niet lang, en de hooggekwalificeerde gespecialiseerde hepatoloog of specialist in infectieziekten decodeert de resultaten van PCR voor hepatitis C. Op basis van de resultaten van de analyse wordt de patiënt gediagnosticeerd.

Om de resultaten van de enquête correct te ontcijferen, houden ze rekening met de indicatoren:

  • biochemische analyse van bloed;
  • ultrasone gegevens;
  • biopsieresultaten.

Interpretatie van kwantitatieve analyse

Bij het verkrijgen van de resultaten van PCR-kwantitatieve analyse, worden de volgende indicatoren in aanmerking genomen:

Basale hepatitis C-testen

Virale hepatitis C is een serieus medisch en sociaal probleem. Ongeveer 180 miljoen mensen in de wereld van vandaag lijden aan deze ziekte, elk jaar sterven er 350 duizend. Lange latente (asymptomatische) loop van hepatitis C leidt tot late diagnose. Analyse van hepatitis C wordt uitgevoerd om de ziekte te diagnosticeren, differentiële diagnose, met zijn hulp, bepalen van de eerder overgedragen ziekte "standing". De studie wordt gebruikt bij patiënten met symptomen van hepatitis C, verhoogde niveaus van leverenzymen, bij het verkrijgen van informatie over eerder overgedragen hepatitis van niet-gespecificeerde etiologie, bij mensen met een verhoogd risico en screeningsstudies.

De diagnose van hepatitis C wordt in 2 fasen uitgevoerd:

Fase 1 Bepaling van de aanwezigheid in het serum van antilichamen tegen het hepatitis C-virus (anti-HCV).

Fase 2 In aanwezigheid van anti-HCV wordt een test uitgevoerd op de aanwezigheid van RNA (ribonucleïnezuur) door PCR op hepatitis C. De test maakt het mogelijk de fase van het proces te identificeren - "actief / inactief", om de kwestie van de noodzaak van behandeling op te lossen. Het is bekend dat ongeveer 30% van de personen die zijn geïnfecteerd met het hepatitis C-virus, zelf de infectie opruimen, omdat ze een sterk immuunsysteem hebben en geen behandeling nodig hebben. Het gebruik van PCR wordt bepaald door het genotype van het virus. Verschillende genotypen reageren anders op de behandeling.

De mate van leverbeschadiging bij hepatitis C wordt bepaald met behulp van een biopsie of andere invasieve en niet-invasieve tests (bijvoorbeeld fibrotest). De mate van leversteatose wordt bepaald door steatotesta. In alle gevallen moet de diagnose van hepatitis C worden gebaseerd op gegevens van het epidemiologisch onderzoek, de kliniek van de ziekte en de gegevens van biochemische bloedonderzoeken.

Fig. 1. Ernstige effecten van virale hepatitis C - intense ascites.

Hepatitis C-test: anti-HCV

Anti-HCV-antilichamen (anti-HCV) zijn specifieke markers voor infectie. In het lichaam van een zieke persoon worden specifieke antilichamen geproduceerd voor de eiwitten van het hepatitis C-virus (antigenen) - immunoglobulinen van de klasse IgM en IgG (anti-HCV-IgM / IgG).

Wanneer een positief resultaat wordt verkregen voor antilichamen tegen het hepatitis C-virus, wordt een bevestigende test uitgevoerd - bepaling van totale antilichamen tegen structurele en niet-structurele eiwitten van het virus. De structurele envelopeiwitten van de E1- en E2-virussen worden geproduceerd door anti-HCV-IgM, nucleocapside-eiwit C-cor (anti-HCV-IgG) en 7 niet-structurele eiwitten-enzymen van NS-anti-HCV-NS-IgG.

Voor de detectie van antilichamen tegen het hepatitis C-virus wordt enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA) gebruikt. Bevestigende tests - RIBA (recombinant immunoblotting), minder vaak Inno-Lia (analyse van synthetische peptiden) worden gebruikt om (+) ELISA-resultaten te bevestigen.

Anti HCV IgM

  • HCV IgM-antilichamen verschijnen 4-6 weken na infectie in het serum en bereiken snel een maximum. Aan het einde van het acute proces (na 5 - 6 maanden) neemt hun concentratie af.
  • Langdurige registratie van de aanwezigheid van anti-HCV-IgM geeft aan dat hepatitis C een chronisch beloop heeft.
  • De toename in het niveau van IgM in de periode van chronische hepatitis C suggereert de reactivering van het infectieproces.
  • Het niveau van IgM-immunoglobulinen stelt u in staat om de effectiviteit van de behandeling te beoordelen.

Anti HCV IgG

HCV IgG-antilichamen verschijnen 11 tot 12 weken na infectie in het serum van de patiënt. Na 5-6 maanden wordt de piekconcentratie vastgelegd. Volgende antilichamen

op een constant niveau blijven tijdens de duur van de ziekte in de acute periode en tijdens de herstelperiode.

Totaal antistoffen tegen hepatitis C-virus

Totale antilichamen tegen het hepatitis C-virus (totaal anti-HCV) worden gebruikt om "verse" gevallen van de ziekte te diagnosticeren. Totale antilichamen zijn antilichamen tegen het nucleocapside-eiwit C-cor (anti-HCV-IgG) en 7 niet-structurele NS-eiwitenzymen (anti-HCV-NS-IgG) anti-HCV-NS3, anti-HCV-NS4 en anti-HCV-NS5.

Totale antilichamen tegen het hepatitis C-virus verschijnen in het serum van de geïnfecteerde persoon na 11 tot 12 weken vanaf het begin van de infectie, bereiken een piek met 5 tot 6 maanden en blijven op een constant niveau gedurende de gehele periode van de ziekte in de acute periode en gedurende 5 tot 9 jaar na de herstelperiode.

Elk van de soorten antilichamen heeft een onafhankelijke diagnostische waarde:

  • AntiHCVC (cor) zijn de belangrijkste indicatoren van contact met hepatitis C.
  • AntiHCVNS3 ontdekte een van de eerste in het proces van seroconversie (productie van antilichamen in reactie op de aanwezigheid van het virus), geeft de ernst van het infectieuze proces aan en duidt op een hoge virale lading. Met hun hulp wordt erfelijke hepatitis C bepaald bij patiënten die niet vermoeden dat ze een infectie hebben. Langdurige aanwezigheid van anti-HCV NS3 in het serum duidt op een hoog risico op chroniciteit van het proces.
  • AntiHCVNS4 suggereert dat het infectieuze proces een lange loop heeft. Het niveau van antilichaamtiters kan worden beoordeeld op de mate van leverschade.
  • AntiHCVNS5 geeft de aanwezigheid van viraal RNA aan. Hun ontdekking in de acute periode is een voorbode van het chronische proces. Hoge antilichaamtiters op de achtergrond van de behandeling suggereren dat de patiënt niet op de behandeling reageert.
  • AntiHCVNS4 en antiHCVNS5. Dit type antilichamen verschijnt in de late stadia van de ontwikkeling van hepatitis. Hun vermindering geeft de vorming van remissie van het infectieuze proces aan. Na de behandeling zijn de titers van anti-HCV NS4 en anti-HCV NS5 binnen 8 tot 10 jaar verlaagd. Dit type antilichaam biedt geen bescherming tegen herinfectie.

Fig. 2. Macrodrug van een lever. Levercirrose bij hepatitis C.

Decoderingsanalyse voor hepatitis C

De afwezigheid van antilichamen tegen het hepatitis C-virus wordt aangegeven door de term "Norm". Dit betekent echter niet altijd de afwezigheid van de ziekte bij de mens. Zo wordt de afwezigheid van antilichamen in het bloed van een geïnfecteerde persoon geregistreerd totdat ze in het bloed verschijnen - tot 6 maanden na het moment van infectie (gemiddeld 12 weken). De periode van afwezigheid van antilichamen in het bloed van een geïnfecteerde persoon wordt een "serologisch venster" genoemd. De testsystemen van de derde generatie (ELISA-3) hebben een hoge specificiteit (tot 99,7%). Ongeveer 0,3% zorgde voor vals positieve resultaten.

De aanwezigheid van anti-HCV duidt op een huidige infectie of infectie in het verleden.

  • Detectie van IgM-antilichamen en anti-HCV Cor Cor IgG, toename in titers van anti-HCV Corët-IgG en (+) PCR-resultaten in de aanwezigheid van klinische en laboratoriumtekenen van acute hepatitis duiden op een acute periode van de ziekte.
  • Detectie van anti-IgM, anti-HCV Corët-IgG, anti-HCV NS-IgG en (+) PCR-resultaat in de aanwezigheid van klinische en laboratoriumtekenen van hepatitis duidt op reactivering van chronische hepatitis C.
  • Detectie van anti-HCV Coré IgG en anti-HCV NS IgG bij afwezigheid van klinische en laboratoriumtekenen van hepatitis en een negatief PCR-resultaat geeft aan dat de patiënt chronische hepatitis heeft in de latente fase.

Fig. 3. Macrodrug van een lever. Primaire leverkanker. Een van de redenen voor de ontwikkeling van oncologie is cirrose van de lever, ontwikkeld op de achtergrond van chronische hepatitis C.

PCR-analyse voor hepatitis C

Polymerase-kettingreactie (PCR) is de "gouden standaard" voor de diagnose van virale hepatitis C. De hoge gevoeligheid van de test maakt het mogelijk om het genetisch materiaal van virussen (RNA) te detecteren, zelfs als er maar een paar in het te bestuderen materiaal zijn. PCR is in staat RNA-virussen te detecteren lang voordat antilichamen in het serum verschijnen, maar niet eerder dan vanaf de 5e dag vanaf het moment van infectie. Wanneer een ziekte door PCR wordt gedetecteerd, worden RNA-virussen niet alleen in serum, maar ook in leverbiopten gedetecteerd.

  • Polymerase-kettingreactie maakt het mogelijk de aanwezigheid of afwezigheid van hepatitis C-virussen in het bloed te bepalen en te beslissen over het begin van de behandeling. Het is bekend dat tot 30% van de patiënten zelf van de infectie afkomt, omdat ze een sterk immuunsysteem hebben en geen behandeling nodig hebben.
  • Hepatitis C PCR wordt gebruikt om de effectiviteit van de behandeling te controleren.
  • PCR wordt gebruikt in de afwezigheid van antilichamen in het bloed, maar in de aanwezigheid van sterke verdenkingen van hepatitis C (verhoogde niveaus van alkalische fosfatase, totaal bilirubine, 2 keer de overmaat aan leverenzymen AST en ALT).
  • PCR-analyse voor hepatitis C wordt gebruikt om de intra-uteriene overdracht van hepatitis-virussen te regelen.

Hepatitis C virale lading

Met behulp van de PCR-analyse is het mogelijk om niet alleen de aanwezigheid van virus-RNA in het bloed te bepalen - een kwalitatieve analyse (gedetecteerd / niet gedetecteerd), maar hun aantal - de virale lading (het aantal eenheden van viraal RNA in 1 ml bloed). Kwantitatieve indicator PCR wordt gebruikt om de effectiviteit van behandeling van hepatitis C te controleren.

De voor PCR gebruikte methoden hebben verschillende gevoeligheid. In de Russische Federatie wordt aanbevolen om, in overeenstemming met de methodologische aanbevelingen van 2014, methoden toe te passen met een gevoeligheid van 25 IE / ml of minder. Volgens de aanbevelingen van de Europese vereniging voor de studie van de lever van 2015 wordt voorgesteld methoden toe te passen voor het bepalen van viraal RNA met een gevoeligheid van 15 IE / ml of minder.

Afhankelijk van de gevoeligheid van het testsysteem, ontvangt de patiënt een of ander resultaat van het onderzoek:

  • De minimale gevoeligheid van de COBAS AMPLICOR-analysator is 600 IE / ml (de analysator van de oude generatie).
  • De minimale gevoeligheid van de HCB-TEST COBAS AMPLICOR-analysator is 50 IE / ml, wat 100 kopieën per ml is.
  • De minimale gevoeligheid van de HCV RealBest RNA-analysator is 15 IE / ml, wat 38 kopieën per ml is (opgenomen in de groep moderne testsystemen). De specificiteit van deze analysers is 100%. Met hun hulp worden RNA's van hepatitis C-virussen van subtypen la en lb, 2a, 2b, 2c en 2i, 3, 4, 5a en 6 gedetecteerd.

Als er RNA-kopieën onder de gevoeligheidsdrempel van deze analysator liggen, ontvangt de patiënt het antwoord "niet gedetecteerd".

Fig. 4. Een voorbeeld van PCR-analyse (kwantitatieve test). De virale lading wordt bepaald voor hepatitis C.

Interpretatie van de resultaten van PCR-analyse voor hepatitis C

  • De afwezigheid van RNA-virus duidt op de afwezigheid van infectie.
  • De afwezigheid van RNA tegen de aanwezigheid van antilichamen in het bloed duidt op het verdwijnen van het hepatitis C-virus onder invloed van behandeling of zelfherstellend.
  • In sommige gevallen is het virus in het bloed aanwezig, maar op subliminale niveaus, wanneer de concentratie niet door analysatoren wordt gemeten. Zulke patiënten blijven gevaarlijk in termen van infectie.
  • Detectie van het RNA-virus gedurende 6 opeenvolgende maanden bij patiënten met acute hepatitis C suggereert dat de ziekte een chronisch verloop heeft gehad.
  • Vermindering van viraal RNA tijdens de behandeling geeft de effectiviteit van de therapie aan en omgekeerd.

Fig. 5. Vette hepatosis. Een van de oorzaken van leverbeschadiging is virale hepatitis C.

Fundamenteel biochemisch bloedonderzoek op hepatitis C

Biochemische bloedtesten helpen bij het vaststellen van de functionele status van veel menselijke organen en systemen.

Hepatische enzymen ALT en AST

Lever-enzymen worden intracellulair gesynthetiseerd. Ze zijn betrokken bij de synthese van aminozuren. Een groot aantal van hen is te vinden in de cellen van de lever, het hart, de nieren en de skeletspieren. Met de nederlaag van de organen (schending van de integriteit van de celmembranen) komen de enzymen in het bloed, waar hun niveau stijgt. Verhoogde niveaus van enzymen worden geregistreerd met de nederlaag (lysis, vernietiging) van levercellen, hartinfarct en andere ziekten. Hoe hoger het niveau van transaminasen in het serum, hoe meer cellen werden vernietigd. ALT overheerst in levercellen, AST - in hartspiercellen. Met de vernietiging van levercellen neemt het ALT-niveau met 1,5 - 2 toe. Met de vernietiging van myocardcellen neemt het niveau van AST met 8 - 10 keer toe.

Bij het diagnosticeren van chronische virale hepatitis, is het noodzakelijk om aandacht te besteden aan de AST / ALT-ratio (de Ritis-coëfficiënt). Een overschot aan AST boven ALT duidt op levercelschade.

  • De norm van AST voor mannen is maximaal 41 eenheden / l, vrouwen - tot 35 eenheden / l, kinderen ouder dan 12 jaar - tot 45 eenheden / l.
  • De norm voor ALT voor mannen is maximaal 45 eenheden / l, vrouwen - tot 34 eenheden / l, kinderen van 12 jaar en ouder - tot 39 eenheden / l.
  • Normaal gesproken (bij gezonde mensen) varieert de AST / ALT-ratio van 0,91 - 1,75.

bilirubine

Bilirubine is een afbraakproduct van hemoglobine. Bilirubine in het bloed wordt gevonden in de vorm van indirect (tot 96%) en direct (4%). Het proces van afbraak van deze stof komt voornamelijk voor in de cellen van de lever, waar het met gal wordt uitgescheiden uit het lichaam. Met de vernietiging van levercellen neemt het niveau van bilirubine in het serum toe. Normaal gesproken is het totale bilirubine-gehalte minder dan 3,4 - 21,0 μmol / L. Op een niveau van 30-35 μmol / L en hoger penetreert bilirubine de weefsels, waardoor de huid en sclera geelzucht krijgen.

Fig. 6. Wanneer hepatitis C in het bloed het niveau van bilirubine verhoogt. De stof dringt de weefsels binnen, waardoor de huid en de sclera geelzucht vertonen.

PCR-diagnostiek voor hepatitis C

Hepatitis C is een ontsteking van de levercellen die optreedt als gevolg van infectie met het HCV-virus (hepatitis C) door contact met het bloed van een geïnfecteerde persoon. De genetische code van het flavivirus HCV wordt gedragen door een RNA (ribonucleïnezuur) molecuul dat zich in de structuur van het virus bevindt. Dit levensbedreigende fenomeen onderscheidt zich door geheimhouding in de beginfase van de pathologie. Het tijdsinterval tussen infectie en het optreden van symptomen (reactie van het immuunsysteem) kan van één maand tot zes maanden zijn. In de regel neemt de ziekte een chronische vorm aan en is deze moeilijk te genezen.

Moderne geneeskunde stelt u in staat om pathologie te diagnosticeren met lichte leverschade. De meest gebruikelijke en effectieve diagnostische methoden omvatten PCR-analyse. Beschouw in dit artikel wat het is en wat voor soort het is.

Wat is de studie

PCR-analyse voor hepatitis C is een laboratoriumonderzoek dat flavirus, het genetische materiaal van ribonuclelenic acid (RNA), detecteert. Het bepaalt het aantal RNA-moleculen in het bloed, de kwaliteit van het biologische materiaal, het genetische type HCV-flavirus.

De PCR-methode voor hepatitis C maakt het mogelijk om de minimale hoeveelheid flavirus vóór de vorming van antilichamen, in de regel, snel na infectie te detecteren.

Het onderzoek wordt vaak aangeduid als RNA-analyse, omdat het ribonucleïnezuurdeeltjes detecteert met een grootte van 30-60 nm in een flavavirus.

Het onderzoek wordt als volgt uitgevoerd: op een lege maag geeft de patiënt bloed uit een ader, die vervolgens op verschillende manieren wordt getest:

  • Realtime PCR wordt uitgevoerd op een gesloten geautomatiseerde manier en heeft een ondergrens voor het detecteren van RNA-virussen van 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLICOR met een gevoeligheid van 50 - 100 IE / ml.

Hoe hoger de gevoeligheidsdrempel van de diagnostische techniek, hoe groter de kans dat het laagste virusgehalte in het bestudeerde biologische materiaal wordt gedetecteerd.

Welke soorten analyse worden gebruikt?

Een analyse die al tientallen jaren met succes is toegepast, wordt PCR-hepatitis genoemd en deze kan vrij gemakkelijk en snel worden opgespoord. In de geneeskunde zijn er twee reactiemethoden die fundamenteel van elkaar verschillen:

  • kwalitatieve methode onthult de aanwezigheid in het biologische materiaal van de genetische bron van een bepaald virus;
  • kwantitatieve analyse meet het aantal genetische materie, dat het mogelijk maakt om de fase van de pathologie te bepalen of om de effectiviteit van de therapeutische weg te evalueren;
  • genotypering bepaalt het type virus dat in het lichaam aanwezig is.

Over het algemeen helpt een bloedtest om de aard van viremie en het genetische type van de ziekteverwekker te identificeren. In de regel wordt het onderzoek 1 keer uitgevoerd, afhankelijk van de mate van gevoeligheid van het diagnosesysteem. Indien nodig wordt het opnieuw testen uitgevoerd met een ultragevoelig reagens.

PCR van hoge kwaliteit

Wat is hoogwaardig PCR-RNA voor hepatitis C? De essentie van de reactie ligt in de aanwezigheid van de hepatitis-RNA-sequentie en de reactie is alleen mogelijk in de aanwezigheid van virale eiwitten van een vergelijkbare etymologie in de ELISA. Tijdens het vergelijken worden de belasting en mogelijke schade aan het levergebied gedetecteerd.

Een onderscheidend kenmerk van deze methode is het vermogen om zelfs de aanwezigheid van een afzonderlijk gen te detecteren.

Opgemerkt moet worden dat de patiënt na ontvangst van de resultaten van een PCR- en ELISA-test een passende behandeling nodig heeft, ongeacht wat het uiteindelijke enzymimmunoassayresultaat was. Positief duidt op infectie en PCR-negatief duidt op een verminderd aantal virale deeltjes ten opzichte van het gevoeligheidsniveau.

Er zijn verschillende omstandigheden die de productie van een negatieve PCR en ELISA beïnvloeden:

  • het ontbreken van passende voorwaarden voor het verzamelen van materiaal;
  • de resulterende analyse bevat verontreiniging;
  • in het geval van een vroege injectie van heparine aan de patiënt.

Van de kant van de patiënt is het niet noodzakelijk om bepaalde regels voor bloedafname voor PCR-analyse in acht te nemen, in dit geval hangt de kwaliteit van deze analyse af van de medische professional die de procedure uitvoert. Het vermogen om de aanwezigheid van de ziekte vast te stellen (vooral in de acute vorm) verschijnt binnen enkele weken na infectie.

Kwantitatieve analyse

Een kwantitatieve test wordt aanbevolen voor het detecteren van virale belasting onmiddellijk voorafgaand aan de vorming van verdere therapie en de reactie van het lichaam. Het proces van bloedafname wordt op dezelfde manier uitgevoerd als met hoogwaardige PCR en ELISA, de enige voorwaarde is dat de patiënt niet vóór de procedure mag worden gerookt.

Wat betreft de kenmerken van de gegevens die zijn verkregen als resultaat van het onderzoek, wordt de verhoogde belasting gekenmerkt door indicatoren van 800000 IE / ml, laag - 400000 IU / ml. De aanwezigheid van een virus in het lichaam van de patiënt wordt aangegeven door de PCR voor hepatitis is geen negatieve kwalitatieve test.

Dit soort onderzoek maakt het mogelijk om te bepalen hoe gevaarlijk de patiënt is voor de mensen om hem heen. De identificatie van een hoog niveau duidt bijvoorbeeld een verhoogde infectiviteit van de patiënt aan. Bovendien helpen de resultaten van de analyse om de verdere meest effectieve behandeling te formuleren en te bepalen hoeveel de bestaande therapie als effectief wordt beschouwd.

De snelle negatieve respons van de tests geeft het succes van de gekozen techniek aan, en de langzame geeft de behoefte aan aanpassingen en het gebruik van verschillende behandelingen aan.

Het proces van het nemen van de analyseprocedure hangt af van de specifieke dag van de ziekte. De eerste bepaling wordt uitgevoerd op de eerste dag nadat de patiënt is opgenomen in het ziekenhuis, waarna de procedure wordt herhaald op 4, 12 en 24 weken na inname van de medicijnen.

Zo toont een kwantitatieve analyse welke behandeling het meest effectief is, de duur van de beschikbare therapie en het gevaar van de patiënt in relatie tot andere mensen.

genotypering

In de studie van materiaalanalyse is het belangrijk om de nauwkeurigheid van het genotype van het virus te bepalen, dat plaatsvindt. Momenteel zijn er 11 variëteiten van het hepatitis C-virus, die op hun beurt bepaalde ondersoorten bevatten.

Al deze soorten reageren anders op verschillende behandelingen en individuele soorten zijn absoluut resistent tegen veel geneesmiddelen.

Het genotype maakt het mogelijk om de toestand van de lever te bepalen en te tonen. Het is niet ongebruikelijk dat de resultaten "niet getypt" worden geregistreerd, wat betekent dat het virus in het bloed van de patiënt niet door dit testsysteem wordt gedetecteerd. Dit kan worden gedetecteerd als een bepaald genotype niet overeenkomt met deze zone. In een dergelijke situatie wordt de analyse herhaaldelijk uitgevoerd en wordt een gevoeliger systeem gebruikt om het materiaal te bestuderen.

Ultragevoelige methode

De ultragevoelige methode is in bepaalde gevallen noodzakelijk wanneer de diagnose van hepatitis niet met andere methoden kan worden uitgevoerd en wanneer een analyse moet worden uitgevoerd door de behandelend arts:

  • in geval van verdenking van de aanwezigheid van hepatitis C-virus bij patiënten met een latent type van de ziekte;
  • de aanwezigheid van antilichamen tegen het hepatitis C-virus, niet bevestigd door PCR-diagnostiek;
  • om de kwaliteit van de effectiviteit van de gekozen behandelmethode te bepalen en de eliminatie van de ziekte te bevestigen.

De gevoeligheid van deze methode is veel hoger dan die gewoonlijk worden gebruikt, maar deze methode sluit niet uit dat valse resultaten worden verkregen, zowel positieve als negatieve. In een dergelijke situatie is het belangrijk om de kwaliteit van de procedure en de mogelijkheid van contaminatie van het materiaal zelf te beheersen.

Uitleg van PCR-analyse

Het decoderen van de analyse wordt uitgevoerd op basis van de gepresenteerde materialen, terwijl de resultaten van laboratoriumonderzoek bepaalde hierboven beschreven gegevens omvatten.

Decodering kan een positieve PCR-polymerasekettingreactie en een negatieve ELISA in de test omvatten, wat betekent dat de patiënt geen tekenen van hepatitis C in het bloed heeft, maar in het verleden heeft hij de acute vorm van de ziekte overgedragen. Als regel nemen specialisten bij het gebruik van PCR-testindicatoren meestal een toevlucht.

Samenvattend van al het bovenstaande, kan worden geconcludeerd dat het tijdens de analyse belangrijk is om alle regels en aanbevelingen te volgen zodat de verkregen resultaten zo nauwkeurig mogelijk zijn en op basis van de verkregen gegevens is het mogelijk om de effectiviteit van de gebruikte therapie en de verdere kans op volledig herstel te bepalen.

PCR-analyse voor hepatitis C

Voor de diagnose van "chronische virale hepatitis C (CVHS)" is een uitgebreid onderzoek van de persoon vereist, waaronder klinische, laboratorium- en instrumentele onderzoeken. Belangrijk vanuit het oogpunt van diagnose voor de juiste diagnose is de PCR-methode - polymerasekettingreactie.

Wat laat deze analyse zien en waarom is het nodig?

Deze laboratoriummethode detecteert het hepatitis C-virus-RNA in menselijk bloed. Samen met enzymgebonden immunosorbent assay (ELISA) voor antilichamen tegen het virus, wordt PCR gebruikt om een ​​diagnose van CVHC en het genotype van zijn pathogeen te maken. Dit onderzoek is een van de nieuwste methoden voor laboratoriumdiagnostiek. De betrouwbaarheid bij CVHS is hoger dan 97%, wat als een zeer goede indicator voor onderzoek wordt beschouwd.

Er zijn drie bloed-PCR-assays voor CVHC: kwalitatieve, kwantitatieve en virusgenotypering. De eerste studie (kwalitatieve analyse) van een virus detecteert het in het bloed en wordt daarom alleen voor de diagnose gebruikt.

Het tweede (kwantitatieve) onderzoek bepaalt de mate van virale belasting van het lichaam en wordt daarom gebruikt om de effectiviteit van de therapie te controleren.

De derde PCR (genotypering) verduidelijkt de diagnose, waarbij het genotype van het virus wordt vastgesteld, wat erg belangrijk is voor de benoeming van een correcte antivirale behandeling.

De essentie van de polymerasekettingreactietechniek is het gebruik van enzymen die het genetische materiaal van het pathogeen in het biomateriaal vermenigvuldigen. In het proces van een dergelijke replicatie wordt de buis met bloed verschillende keren verwarmd en afgekoeld tot de temperatuur die nodig is om de enzymatische reactie te versnellen. Als gevolg van deze manipulaties neemt de hoeveelheid van het virale genoom vele malen toe, waardoor het zelfs met een minimale hoeveelheid kan worden gedetecteerd.

PCR-diagnostiek heeft veel voordelen ten opzichte van andere laboratoriumtests:

  • hoge gevoeligheid - 97-98%;
  • gegarandeerde analytische specificiteit (onthult precies de pathogeen die u wilt vinden, en niet de verwante stam);
  • geleidingssnelheid (het duurt niet meer dan 2 dagen om een ​​conclusie te trekken).

Drie soorten PCR-testen

Hoogwaardige PCR-analyse wordt toegewezen aan alle patiënten bij wie ELISA-analyse antilichamen tegen het HVGS-virus detecteerde. Na het uitvoeren van PCR van hoge kwaliteit, kunnen twee responsopties worden verkregen: "RNA wordt gedetecteerd" of "RNA wordt niet gedetecteerd". Om de minimale hoeveelheid virus in het bloed te detecteren, zijn testsystemen met een gevoeligheid van ten minste 50 IE / ml nodig. Als de concentratie van het virus in het bloed van de patiënt minder is dan het diagnosticum kan bepalen, kan het resultaat van het onderzoek vals negatief zijn. Om een ​​dergelijke diagnostische fout te voorkomen, moeten laboratoria die PCR-diagnostiek uitvoeren, worden voorzien van uiterst gevoelige testsystemen. In het laboratorium "Invitro" worden bijvoorbeeld tests met een gevoeligheid van 15 IU / ml gebruikt. Laboratoriummedewerkers zijn verplicht om op hun eerste verzoek informatie te verstrekken over de gevoeligheid van de tests voor patiënten en artsen.

Kwantitatieve analyse van PCR bepaalt de mate van viremie, dat wil zeggen de concentratie van het pathogeen in het bloed, virale lading. Het resultaat van deze studie, in tegenstelling tot hoogwaardige PCR, wordt uitgedrukt in aantallen, bijvoorbeeld 2 × 10 * 6 IU / ml, wat 2 miljoen internationale eenheden betekent in 1 ml bloed. Sommige laboratoria gebruiken een andere indicator - het aantal kopieën / ml. Deze twee indicatoren zijn eenvoudig te converteren: 1 internationale eenheid is gelijk aan 4 kopieën van RNA. Dus zal 2x10 * 6 IU / ml betekenen dat 8 x 10 * 6 kopieën van viraal RNA in 1 ml, d.w.z. 8 miljoen exemplaren in 1 ml bloed.

Genotypering is de definitie van een van de zes genotypen van een virus. Het klinische beeld, de mate van ontwikkeling van complicaties van de lever en de prognose voor het toekomstige leven van de patiënt hangen af ​​van het genotype van de veroorzaker. Het genotype van het virus is al erg belangrijk in het stadium van de diagnose, omdat de combinatie van geneesmiddelen en de duur van het therapeutische beloop dat aan de patiënt moet worden toegewezen, afhankelijk is van de juiste bepaling.

Maar zelfs dit schijnbaar 'perfecte' laboratoriumonderzoek heeft zijn nadelen:

  • de studie repliceert het genetische materiaal van alle pathogenen, zelfs niet-levend, wat het resultaat kan verstoren. Daarom wordt, om de effectiviteit te bewaken met behulp van PCR, een heranalyse uitgevoerd niet eerder dan 2 maanden na de vorige, zodat de dode virussen het lichaam van de patiënt kunnen "verlaten";
  • een deel van het virale genoom, dat wordt bepaald met behulp van testsystemen, kan theoretisch aanwezig zijn in andere virussen of micro-organismen, dus er is een mogelijkheid van een vals positieve respons;
  • virussen muteren snel. Soms is de snelheid en mate van virusmutatie zo hoog dat het testsysteem stopt met het vangen van hun genoom. Als gevolg hiervan is een fout-negatief resultaat mogelijk.

Om deze tekortkomingen te verhelpen, voeren fabrikanten van laboratoriumtestsystemen voor PCR-diagnostiek voortdurend hun tests uit, waaronder kruisreacties en gevoeligheid voor een bepaald genotype van het virus.

Hoe een PCR-test voor hepatitis C te nemen?

Om de conclusie van een PCR-onderzoek betrouwbaar te maken, is het noodzakelijk om de voorbereidingsregels voor zijn gedrag strikt te volgen:

  • onderzoek wordt uitgevoerd op een lege maag (glucose, vetten, mineralen, die het bloed binnendringen van voedsel, kunnen de snelheid en kwaliteit van de enzymreactie beïnvloeden);
  • de kloof tussen de laatste maaltijd en bloedmonsters voor analyse moet ten minste 8 uur zijn;
  • aan de vooravond van het onderzoek is het verboden om alcohol te gebruiken en vet voedsel te consumeren, waarvan de eliminatieperiode aanhoudt;
  • een dag voordat je naar het laboratorium gaat, moet je sterke lichamelijke en emotionele stress vermijden;
  • totdat het moment van bloedafname niet wordt aanbevolen om te roken.

Om te voorkomen dat valse conclusies verschijnen, moet de vermeende patiënt iets eerder naar het laboratorium komen dan bloed zal worden afgenomen. Het duurt 15-20 minuten voor een persoon om op adem te komen, te kalmeren. Adrenaline, die na een korte wandeling in het bloed aanwezig is, kan het resultaat van het onderzoek beïnvloeden.

Als de patiënt die voor analyse wordt doorverwezen, medicijnen gebruikt, moet hij dit aan de arts melden. Het is mogelijk dat sommige van hen enige tijd moeten worden geweigerd (indien mogelijk).

Het resultaat van de analyse van PCR voor hepatitis C

Decodering van de resultaten betrokken bij de laboratoriumarts van het laboratorium dat de analyse heeft uitgevoerd. Decodering is de definitie van de afwijking van het resultaat verkregen uit de norm. De snelheid van indicatoren wordt rechtstreeks vastgesteld door de fabrikant van het testsysteem, dat door het laboratorium wordt gebruikt voor diagnostische doeleinden. Daarom is het niet verrassend dat in sommige laboratoria de virale lading wordt bepaald in IE / ml, en in andere in kopieën / ml.

Na de conclusie te hebben ontvangen, is het noodzakelijk om het correct te kunnen interpreteren. De behandeling van de resultaten van de studie moet worden uitgevoerd door de behandelende arts van de patiënt met hepatitis C. Alleen na een objectief, instrumenteel en laboratoriumonderzoek van de patiënt, kan de arts een voldoende hoeveelheid gegevens verkrijgen voor een juiste interpretatie van de verkregen PCR-resultaten.

Evaluatie van kwalitatieve analyse veroorzaakt in de regel geen problemen, zelfs niet bij patiënten. Het resultaat kan er maar één zijn: "gedetecteerd" of "niet gedetecteerd". In dit geval is de tweede norm de norm.

Indicatoren voor kwantitatieve analyse zijn moeilijker te interpreteren. Het toont de mate van virale belasting van de patiënt. Zelfs onder hepatologen is er geen consensus over hoe de gedetecteerde viremie moet worden behandeld. De meeste artsen zijn geneigd te geloven dat een hoge belasting van meer dan 8 × 10 * 5 IE / ml moet worden overwogen. Een belasting van meer dan 1 × 10 * 7 IU / ml wordt als zeer hoog beschouwd, terwijl een lage belasting minder is dan 4 × 10 * 5 IU / ml.

De mate van virale belasting suggereert virulentie (agressiviteit) van het virus: hoe groter de hoeveelheid in het bloed, hoe sneller de complicaties van de lever zich kunnen ontwikkelen. Een hoge concentratie van het virus in het bloed van een zwangere vrouw verhoogt de kans op penetratie door de hemato-placentale barrière naar de foetus. Viremie beïnvloedt ook de effectiviteit van de behandeling: bij lage aantallen is de effectiviteit van de therapie hoger dan bij hoge.

Om zeker te zijn van de nauwkeurigheid van de PCR-analyse voor hepatitis C, is het noodzakelijk om alleen de voorkeur te geven aan laboratoria die goed hebben gewerkt. Het prijsbeleid in dit geval mag geen primaire rol spelen.


Meer Artikelen Over Lever

Hepatitis

Dieet "Tabel 5" - menu voor elke dag

Vandaag analyseren we gedetailleerd het menu voor elke dag van het dieet "Tabel 5", de kenmerken ervan, een lijst met toegestane en verboden voedingsmiddelen, en ook recepten.
Hepatitis

Virale hepatitis D (D, Delta). Oorzaken, methoden van infectie, diagnose

Het virus dat hepatitis D (D), of "delta-agent" veroorzaakt, is de meest unieke en, tegelijkertijd, de meest virulente van alle hepatotropische virussen.